Progress in Plant Protection

Applicability of zymograms for detection of granary weevil (Sitophilus granarius L.) α-amylases left
on grain after insects infestation

Możliwość zastosowania zymogramów do detekcji α-amylaz wołka zbożowego (Sitophilus granarius L.) pozostałych na ziarnie po żerowaniu owadów 

Dorota Piasecka-Kwiatkowska, e-mail: dorotapk@up.poznan.pl

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu Katedra Biochemii i Analizy Żywności , Mazowiecka 48, 60-623 Poznań, Polska

Jan Nawrot

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy Zakład Entomologii , Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań , Polska

Magdalena Gawlak

Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy Zakład Entomologii , Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań , Polska

Magdalena Zielińska-Dawidziak

Uniwersytet Przyrodniczy w Poznaniu Katedra Biochemii i Analizy Żywności , Mazowiecka 48, 60-623 Poznań , Polska
Streszczenie

50 wheat grains of Korweta variety were infested with ten or twenty males of granary weevil and exposed for five or ten days. After that time the beetles were removed, and the extracts from grains were prepared and zymograms were done. Clearing zones observed on zymograms, showed the presence of granary weevil α-amylase in all grain extracts obtained after insects feeding. The obtained revealed that both, hidden grain infestation by the pest, as well as grain contamination with the pest metabolism products were possible to detect using the native electrophoresis with zymograms. Although the intensity of clearing zones was larger when the extracts were obtained from the grain with a greater number of insects feeding for a long time, the relationship between the number of insects, time feeding and α-amylase activity was not clearly shown. The amount of granary weevil α-amylases left on grain by feeding males was related to the time of feeding as well as individual activity of enzyme secreted by the salivary gland.

 

Do 50 ziarniaków pszenicy odmiany Korweta wprowadzano po 10 i 20 samców wołka zbożowego i pozostawiono przez okres 5 i 10 dni. Po tym czasie usuwano owady, a z ziarna przygotowywano ekstrakty i sporządzono zymogramy. Na uzyskanych obrazach stwierdzono przejaśnienia świadczące o obecności α-amylaz wołka zbożowego we wszystkich ekstraktach ziarna, na którym żerował owad. Uzyskane wyniki wykazały, że elektoroforeza natywna z zymogramami, pozwala na wykrycie ukrytego porażenia ziarna, ale również na wskazanie ziarna, w którym nie ma już owadów, jednak pozostają produkty przemiany materii. Zasadniczo intensywność przejaśnień była większa wówczas, gdy ekstrakty były otrzymywane z ziarna, na którym większa ilość owadów żerowała przez dłuższy czas, jednak nie można jednoznacznie wykazać zależności pomiędzy liczbą owadów, czasem żerowania a aktywnością pozostawionej α-amylazy. Ilość α-amylaz pozostawionych na ziarnie przez żerujące samce jest związana zarówno z czasem żerowania owadów, jak i z osobniczą aktywnością enzymu w wydzielinie gruczołów ślinowych. 

Słowa kluczowe
granary weevil; grain infestation; α-amylase; zymograms; wołek zbożowy; porażenie ziarna; α-amylazy; zymogramy
Progress in Plant Protection (2013) 53: 70-73
Data pierwszej publikacji on-line: 2013-03-30 00:00:00
http://dx.doi.org/10.14199/ppp-2013-119
Pełny tekst (.PDF) BibTeX Mendeley Powrót do listy