@Articles{,
    	author	 = {Anna Filipiak},
    	title 	 = {{Zastosowanie techniki RT-PCR do identyfikacji węgorka sosnowca (Bursaphelenchus xylophilus) (Steiner et Buhrer, 1934) Nickle, 1970 w próbkach drewna poddanych obróbce termicznejThe use of RT-PCR technique for identification of the pine wood nematode (Bursaphelenchus xylophilus) (Steiner et Buhrer, 1934) Nickle, 1970 heat-treated wood samples}},
    	journal  = {Progress in Plant Protection},
    	year	 = {2025},
    	volume   = {65},
    	number   = {4},
		pages    = {304-308},
    	abstract = {Identyfikacja pozwalająca odróżnić żywe osobniki węgorka sosnowca od martwych jest szczególnie ważna podczas rutynowej granicznej kontroli fitosanitarnej drewna i opakowań drewnianych wwożonych na teren Unii Europejskiej. Jeżeli w drewnie, po skutecznie prze­prowadzonym zabiegu termicznym pozostają martwe osobniki nicieni, analiza molekularna oparta na DNA może dać fałszywe wyniki pozytywne. Lepszym rozwiązaniem jest przeprowadzenie analizy na podstawie obecności RNA nicieni, ponieważ ulega ono szybkiemu rozkładowi po ich śmierci. Badania przeprowadzano z wykorzystaniem techniki RT-PCR, obejmującej odwrotną transkrypcję RNA do cDNA, a następnie amplifikację za pomocą reakcji PCR. Wyniki wykonanych analiz wykazały obecność RNA węgorka sosnowca zarównow osobnikach żywych, jak i martwych, w których RNA utrzymywało się jeszcze przez kilka dni po zabiegu (do 5 dni po obróbce termicznej). Podczas tej samej reakcji PCR, otrzymywano również produkty dla DNA Bursaphelenchus xylophilus o innej długości, co w łatwy sposób umożliwiło odróżnienie RNA od DNA tego gatunku nicienia. Dodatkowo, przeprowadzona analiza molekularna nicieni wprowadzonych do krążków drewna, poddanych obróbce termicznej, a następnie wyekstrahowanych z nich nicieni, potwierdziła prawidłowość przepro­wadzonego zabiegu, gdyż w żadnym przypadku nie wykrywano nicieni. Identification, allowing the distinction between live and dead PWN individuals, is particularly important during routine border phytos­anitary inspections of wood and wooden packaging imported into the European Union. If dead nematodes remain in the wood after suc­cessful thermal treatment, DNA-based molecular analysis may yield false positive results. A better approach is to analyze the presence of nematode RNA, as it degrades rapidly after their death. The study was carried out using an RT-PCR assay, involving reverse transcription of RNA into cDNA and subsequent PCR amplification. The results of the analyses demonstrated the presence of PWN RNA in both live and dead individuals, in which the RNA persisted for several days after treatment (up to 5 days after heat treated). During the same PCR reaction, Bursaphelenchus xylophilus DNA products of different lengths were also obtained, easily distinguishing RNA from DNA. Addi­tionally, the molecular analysis of nematodes introduced into the heat treated wood discs and then extracted from them confirmed the correctness of the procedure, as no nematodes were detected in any case.},
		affiliation = {Instytut Ochrony Roślin – Państwowy Instytut Badawczy, Władysława Węgorka 20, 60-318 Poznań, Polska},
		keywords = {obróbka termiczna drewna, opakowania drewniane, nicienie, RNA, heat-treated wood, wooden packaging, nematodes},
    	url 	 = {https://www.progress.plantprotection.pl:443/?node_id=35&ma_id=4608}
    }